产品分类
相关文章

您的位置:首页 > 产品中心 > 实验代做 > 分子生物学 > 斑点杂交实验服务

产品中心
产品名称:

斑点杂交实验服务

产品型号:
更新时间: 2022-03-25
描述:提供商: 杭州研谨生物
服务名称: 斑点杂交实验服务
规格: 实验服务
价格: 2000元
我们致力于在生命科学领域、生物医学实验外包及论文润色服务,协助客户各类实验服务及论文润色,是客户您值得信赖的科研合作伙伴!
如果您受时间、试验条件等限制而无法完成您的课题研究,欢迎您与我们联系。

产品介绍

品牌其他品牌产地类别进口
应用领域医疗卫生,生物产业

斑点杂交实验服务

 

 

实验技术简介:斑点杂交(Dotblot) 是将被检标本点到膜上,烘烤固定。这种方法耗时短,可做半定量分析。- 张膜上可同时检测多个样品,为使点样准确方便,市售有多种多管吸印仪(Manifold) , MinifoldIII. Smart Botter(Wealtec).Bio-Dot(Bio-Rad)Hybri-Dot,它们有许多孔,样品加到孔中,在负压下就会流到膜上呈斑点状或狭缝状。反复冲洗进样孔,取出膜烤干或紫外线照射以固定标本,这时的膜就可以进行杂交。

 

实验技术原理:

斑点杂交是指将待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜(或尼龙膜、NC), 用已标记的探针进行杂交,洗膜(除去未接合的探针), 放射自显影,判断是否有杂交及其杂交强度,主要用于基因缺失或拷贝数改变的检测。

 

实验操作流程:

1. DNA斑点杂交

①先将膜在水中浸湿,再放到15*SSC中。

②将DNA样品溶于水或TE,煮沸5min,冰中速冷。

③用铅笔在滤膜上标好位置将DNA点样于膜上,每个样品-般点5ul(2~10μg DNA)

④将膜烘干,密封保存备用。

2RNA斑点杂交

与上法类似、,每个样品至多加10μgRNA (经酚/0仿或异硫青酸胍提取纯化)。 方法是将RNA溶于5μl DEPC水,加5μI甲醛/SSC缓冲液(10*SSC中含6.15moI/L甲醛) ,使RNA变性,然后取5-8μI点样于处理好的滤膜上,烘干。

3、完整细胞斑点杂交

应用类似检测细菌菌落的方法,可以对细胞培养物的特异序列进行快速检测,将整个细胞点到膜上,经NaOH处理,使DNA暴露、变性和固定,再按常规方法进行杂交与检测。有人曾用此法从105个培养细胞中检测到至少5pgEpstein-Barr病毒DNA。完整细胞斑点印迹法可以用于筛选大量标本,因为它使细胞直接在膜上溶解,所以DNA含量甚至比常用的提取法还高,又不影响与32P标记的探针杂交,但它不适用于非放射性标记探针,因为DNA纯度不够,会产生高本底。

 

实验注意事项:

客户提供:

TotalRNA (DNA) 20ug,浓度> 1ug/ul, A260/A280>1.8;提供标记后的探针,需同时告知标记后探针的浓度及活性,待检测目的基因的Genbank序列号。

 

交付标准:

1、图片

2.完整项目报告(材料、试剂、仪器、方法、数据分析、实验结果)

其他:

1.点样量不要太大,否则杂交后,X光片上点太大,互相影响。

点样前尼龙膜无需预处理,点样后自然晾干后, 分别在变性液和中和液中进行变性和中和。

 

收费标准/服务周期/提供结果:

欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。

更多实验技术服务请浏览网站其他内容,或来电详询


相关产品

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

杭州研谨生物科技有限公司(www.yanjinbio.cc)主营:wb代做,蛋白双向(2-D)电泳,半定量RT-PCR,PKC活性检测,明胶酶谱MMP,免疫共沉淀,流式多因子检测,CCK8代做

邮箱:hzyanjinbio@163.com

地址:杭州市钱塘区中豪七格商业中心1幢1615

版权所有 © 2022 杭州研谨生物科技有限公司   备案号:浙ICP备2022007326号-1  管理登陆  技术支持:化工仪器网  sitemap.xml

在线咨询 在线咨询 联系方式 二维码

服务热线

400-665-0203

扫一扫,关注我们