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简述免疫荧光染色试剂的选择和存放要求

时间:2022-09-02 浏览次数:57

  免疫荧光染色是将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少,相对使用标记抗体用量偏大。利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。
  免疫荧光染色试剂的选择和存放要求:
  选择荧光要谨慎:
  免疫荧光技术的一个主要优势在于它为多重检测提供了机会,如今流式细胞仪能检测每个细胞中20多个离散参数。在设计多重实验时,应考虑每种荧光基团的*性质,如最大吸收波长和最大发射波长,消光系数和斯托克斯位移等因素。人们通常要检测组织或细胞样本中的多个抗原,必须选择光谱不重叠的荧光基团。即使是最hao的检测系统,也无法克服仪器和试剂之间的不匹配。
  荧光试剂要存放:
  尽管许多荧光基团具有相对的光稳定性,但在保存和染色过程中若未能避光,则可能导致荧光基团-抗体结合物降解,引起假阴性结果。荧光物质必须在建议温度下小心保存,并始终注意避光,以保护其光谱完整性。特别指出,串联的荧光基团对频繁操作引起的不稳定性特别敏感。尽管免疫荧光技术提供了准确的结果,但也存在一些缺点,包括自发荧光、荧光信号的淬灭,以及标本存储过程中的信号褪色。按照建议的实验方案来操作,研究人员可以避免一些技术上的缺陷。

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