免疫组化IHC染色使用技巧都有哪些呢

时间：2022-05-05 浏览次数：233

　　免疫组化IHC染色使用免疫学和生化技术，通过与目标抗原相互作用的标记抗体来检查不同的组织切片。可见标记或染色剂用于可视化抗体抗原相互作用。IHC可以可视化细胞的*细胞成分，广泛被病理学家和诊断人员使用。

　　免疫组化IHC染色使用技巧：

　　每次开始做时，都必须先清点实验的必需品是否齐全。想好可能发生的意外，并先想好补救措施。当抗体不够用的情况下，原先买的抗体最好不要用完，留做可能需要的验证试验。新的抗体要尽量同公司，同批号。

　　抗体反复冻融可使效价降低。抗体要防止污染。不可用塑料保存，塑料可吸附抗体。抗体稀释：应遵循“现用现配”的原则，对于PBS（其他稀释液，注意PH值，PBS为偏中碱性）稀释的抗体最好要当天使用。稀释比例恰好为佳，注意前带和后带效应。

　　选择实验要做的抗体时，要结合他们的正常组织和癌组织的分别表达率。

　　试剂盒的选择可结合生物素强弱的情况。如：肝组织生物素含量高，S-P试剂盒生物素含量也高，故不能配合使用。

　　吹干封片时不能有泡泡。若是没封好，可进行二甲苯、酒精脱树胶，吹干再次封片，但镜下效果会明显变差。因而，若没必要，最好不要再次脱胶。DAB显色需用中性树胶封片，AEC（易溶于有机溶剂）需用水性胶封片。

　　刚封完的载玻片会移动，故切片还没干时，尽量不要碰到盖玻片，可避免树胶溢出，片的整体效果不好。

免疫组化IHC染色