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免疫组化IHC染色使用技巧都有哪些呢

时间:2022-05-05 浏览次数:139

   免疫组化IHC染色使用免疫学和生化技术,通过与目标抗原相互作用的标记抗体来检查不同的组织切片。可见标记或染色剂用于可视化抗体抗原相互作用。IHC可以可视化细胞的*细胞成分,广泛被病理学家和诊断人员使用。
  免疫组化IHC染色使用技巧:
  每次开始做时,都必须先清点实验的必需品是否齐全。想好可能发生的意外,并先想好补救措施。当抗体不够用的情况下,原先买的抗体最好不要用完,留做可能需要的验证试验。新的抗体要尽量同公司,同批号。
  抗体反复冻融可使效价降低。抗体要防止污染。不可用塑料保存,塑料可吸附抗体。抗体稀释:应遵循“现用现配”的原则,对于PBS(其他稀释液,注意PH值,PBS为偏中碱性)稀释的抗体最好要当天使用。稀释比例恰好为佳,注意前带和后带效应。
  选择实验要做的抗体时,要结合他们的正常组织和癌组织的分别表达率。
  试剂盒的选择可结合生物素强弱的情况。如:肝组织生物素含量高,S-P试剂盒生物素含量也高,故不能配合使用。
  吹干封片时不能有泡泡。若是没封好,可进行二甲苯、酒精脱树胶,吹干再次封片,但镜下效果会明显变差。因而,若没必要,最好不要再次脱胶。DAB显色需用中性树胶封片,AEC(易溶于有机溶剂)需用水性胶封片。
  刚封完的载玻片会移动,故切片还没干时,尽量不要碰到盖玻片,可避免树胶溢出,片的整体效果不好。
 

免疫组化IHC染色

 

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