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切片技术是病理科一项常规病理工作,临床医生切取的离体组织送检到病理科,经过取材、固定、脱水、浸蜡、包埋、切片和染色等一系列技术处理所得到的切片,病理医生对其做出最终诊断的病理技术。
冰冻切片常用于免疫荧光实验。其是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度,然后进行切片的方法。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便,而多应用于手术中的快速病理诊断。该切片的种类较多,有低温恒冷箱切片法,二氧化碳切片法,甲醇循环制冷切片法等。
制作冰冻切片时有哪些需要注意的事项:
1、减少冰晶形成:切片前组织不能经过任何固定剂浸泡,也不能接触水份,应保持干净,甚至我们可以用滤纸把组织表面的水份吸取干净,可以大大减少冰晶的形成。未固定的新鲜组织在低温下迅速冷冻,即所说的骤冷,这样可以尽量缩小冰晶,以保持组织原来的结构。
2、保持切片完整:
①有脂肪组织应降低冰冻点,例如乳腺肿瘤标本常带有脂肪组织,冰冻温度应-30~-35℃。
②当切片时发现组织较脆时应提高冰冻温度,或在室温停留片刻,例如肝脏、甲状腺标本。
③切片刀钝或较脏时切片出现刮痕,使切片不完整,应及时更换新刀。
3、防止切片卷缩:调节好防卷板,保持防卷板干净、平整、无缺损、无划伤。采取相应措施去除静电,切片时间过长时,应注意间隔一会,盖上冷冻室盖,降低防卷板温度。
4、载玻片黏贴:载玻片应放在常温的地方,不可放在冷冻仓室中,这样可以保持冰冻组织片与载玻片有一定的温差,有利于切片的附贴,防止脱片的发生。载玻片应保持干净。
5、选择适合标本:骨组织没有脱钙,不适合切片,纯脂肪组织很难切片,一般厚度不能成片,需要厚一些可切成片;固定后的组织很容易脱片,不能进行切片,微小组织不适合冰冻切片。