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流式多因子检测的方法有很多,它们的区别是什么?

时间:2022-09-19 浏览次数:96

   流式多因子检测实验服务技术是基于包被抗体的微球并利用流式细胞仪同时对多种蛋白质进行定量分析的创新性技术。它是一系列不同荧光强度、各自包被不同捕获抗体的微球,在同一反应中与少量样本混合孵育来捕获相应抗原,再与带荧光标记的第二种抗体以双抗夹心的结合方式,用流式细胞仪来检测区别不同微球,再分析每个微球上的定量抗原的荧光素强度,根据已知浓度的标准蛋白和对应的荧光强度绘制标准曲线,来拟合计算未知样本中的相应抗原浓度。
  流式多因子检测基本原理:利用一系列带有荧光标记的微小、分散的微球连接特定的捕获抗体以捕捉溶液系统中的待测物,通过对应各种不同检测物的特异微球上所带有荧光强度不同从而同时测定分析样本中多种可溶性成分的数量。
  流式多因子检测的方法一般分为生物学、分子生物学测定法及免疫学,它们的区别在于:
  1、生物学测定法 其原理是根据细胞因子对特定的依赖性细胞株(即靶细胞)的促增殖作用,以增殖细胞中的DNA的合成或酶活性为指标,间接推算出细胞因子的活性单位,如对IL-1、IL-2等细胞因子活性的检测。亦可根据某些细胞因子对特定靶细胞的杀伤效应或对病毒的抑制作用进行测定,如对肿瘤坏死因子及干扰素的生物活性测定。
  2、分子生物学测定法 目前采用的技术有各种印迹法、斑点杂交、原位杂交和PCR等。通过检测细胞内细胞因子的基因组成或mRNA量,推算出细胞因子的合成量。
  3、免疫学检测法 其基本原理是将细胞因子作为抗原进行定量检测。如免疫斑点法、ELISA法、免疫印迹法和流式细胞仪等均已用于细胞因子的检测。

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