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培养基选择及冻存细胞复苏技巧

时间:2022-04-24 浏览次数:533

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备:1640 基础培养基(推荐:iCell-0002),优质胎牛血清10 %P/S 1 %

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二.细胞处理:

1 冻存细胞的复苏:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

实验代做服务:

 

 


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